OBJETIVO
Comprobar el grupo sanguíneo ABO y RhD y verificar la
presencia de anticuerpos irregulares
REACTIVO
·
1 microtubo que contiene anti-A monoclonal
[línea celular A5]
·
1 microtubo con anti-B monoclonal [línea celular
G½]
·
1 microtubo con anti-D monoclonal [líneas
celulares LHM59/20 (LDM-3) + 175-2]
·
3 microtubos con antiglobulina humana
poliespecífica (anti-IgG de conejo y anti-C3d monoclonal, línea celular C139-9)
·
Conservante: < 0,1% NaN3.
Todos ellos incluído en la matriz gel de la tarjeta ID-Card
˝DiaClon Type + Screen˝
·
ID-DiaCell I-II-III para el escrutinio de
anticuerpos
·
ID-Diluent 2: LISS modificada para suspensiones
de eritrocitos.
La antiglobulina humana anti-lgG includia en la tarjeta
ID-Card ˝DiaClon Type + Screen˝ no es específica únicamente para las cadenas
pesadas, por lo cual puede también reaccionar con las cadenas ligeras kappa (k)
y lambda (l) de las moléculas IgA e IgM.
MATERIAL
·
Micropipetas
·
Puntas de pipeta
·
Incubadora a 37ºC
·
Tubos para las suspensiones
·
Centrífuga
MUESTRA
Sangre preferiblemente recién extraída
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA DE SANGRE
a) Suspensión de hematíes (para la determinación ABO/D)
Preparamos una suspensión de hematíes al 5% en el ID-Diluent
2:
Dejamos que el diluyente alcance la temperatura ambiente
antes de utilizarlo.
Pipeteamos 0,5 ml del ID-Diluent 2 en un tubo limpio y
agregamos 50 μl de sangre total o 25 μl de concentrado de hematíes, mezclando
cuidadosamente.
b) Plasma o suero para el escrutinio de anticuerpos.
Cuando las muestras no vayan a analizarse inmediatamente
deben conservarse a 2–8 °C después de la separación durante un máximo de 48
horas, y después a -20 °C según los criterios/directrices locales/nacionales.
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
1. Identificamos la tarjeta ID-Card
2. Retiramos la lámina de sellado sólo de los microtubo que
se vayan a utilizar manteniendo la tarjeta ID-Card en posición vertical.
Pipeteamos 10 μl de
la suspensión de hematíes del paciente en los primeros 3 microtubos (anti‑A,
anti-B, anti-D) de la tarjeta-ID.
Pipetamos 50 μl de cada ˝ID-DiaCell I-II-III˝ en los
microtubos 4, 5 y 6 (3 x AHG).
Agregamos 25 μl de plasma o de suero del paciente en los
microtubos 4, 5 y 6.
Incubamos la tarjeta ID-Card durante 15 minutos a 37 °C en
la ID-Incubadora.
Centrifugamos la tarjeta ID-Card durante 10 minutos en la
ID-Centrífuga.
Leemos y anotar las reacciones.
INTERPRETACIÓN DE LOS
RESULTADOS
Positivo: Los hematíes aglutinados forman una línea roja
sobre la superficie del gel o están repartidos en el gel.
Negativo: Sedimento compacto de hematíes en el fondo del
microtubo.
Una reacción negativa
indica la ausencia de anticuerpos irregulares detectables en el suero o plasma
del paciente.
Una reacción positiva indica la presencia de anticuerpos
irregulares. Escribir los resultados de la reacción en la tabla de antígenos.